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      1、細胞形態與生長情況

      hiPSC/hESC 培養基-ncEpic 連續培養的hiPSC(P20)細胞形態圖示。
      圖A、B、C、D分別為培養第1、2、3、4天時,顯微鏡下hiPSC的形態圖示。標尺:200μm。

      2、細胞形態與生長情況

      Nuwacell?-VTN包被蛋白連續培養的hiPSC(P20)細胞形態圖示。
      圖示別為培養第1、2、3天時,顯微鏡下hiPSC的形態圖示,使用Nuwacell? hiPSC/hESC 培養基-ncEpic培養。標尺:200μm。


      3、細胞形態與生長情況

      Nuwacell? hiPSC/hESC高效凍存液保存的hiPSC(P13)復蘇后細胞形態圖示。

      圖示分別為細胞復蘇第1、2、3天時,顯微鏡下hiPSC的形態圖示,使用Nuwacell? hiPSC/hESC 培養基-ncEpic培養。標尺:200μm。

      4、電轉液效果對比圖片

      圖A-圖B:Nuwacell? hPSC細胞電轉液不加入質粒18小時后細胞顯微鏡下圖示。標尺:200μm

      圖C-圖D:Nuwacell? hPSC細胞電轉液加入質粒18小時細胞顯微鏡下圖示。標尺:200μm

      5、電轉液效果對比圖片

      圖A-圖B:Nuwacell? hMSC細胞電轉液不加入質粒24小時后細胞顯微鏡下圖示。標尺:200μm

      圖C-圖D:Nuwacell?hMSC細胞電轉液加入質粒24小時后細胞顯微鏡下圖示。標尺:200μm

      6、細胞形態與生長情況

      Nuwacell? 科研級hiPSC細胞株連續生長形態圖示。

      圖示分別為培養第1、2、3天時顯微鏡下hiPSC的形態圖示。A:RC01001-A;B:RC01001-B。標尺:200μm。

      7、細胞表面標志物檢測

      Nuwacell?? 科研級hiPSC 細胞株A:RC01001-A;B:RC01001-B)表面標志物檢測結果。

      上圖為流式細胞分析結果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細胞表面標志物抗體。


      8、多能基因檢測

      Nuwacell?? 科研級 hiPSC 細胞株( A:RC01001-A;B:RC01001-B)的多能性基因檢測。

      上圖為qRT-PCR分析結果,OCT4與NANOG為細胞多能基因。



      9、基因組穩定性檢測

      Nuwacell? 科研級hiPSC 細胞株(?A:RC01001-A;B:RC01001-B的基因組穩定性檢測。

      RC01001-A:46,XY;RC01001-B:46,XX。結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。


      10、分化潛能檢測

      Nuwacell?? 科研級hiPSC 細胞株 A:RC01001-A;B:RC01001-B)?在免疫缺陷小鼠體內形成畸胎瘤。

      外:外胚層神經組織)、軟中:中胚層(軟骨組織)、內:內胚層腸上皮組織),成瘤時間7周。標尺:200μm.


      11、Blebbistatin傳代hPSC細胞圖片

      終濃度2.5μM的Blebbistatin傳代hiPSC(P18)形態圖片,使用Nuwacell? hiPSC/hESC 培養基-ncEpic培養。
      圖示分別為培養第1、2、3天時,顯微鏡下hiPSC形態圖示。標尺:200μm。







      12、Nuwacell? hPSC Dissociation Buffer 消化 hPSC 示例

      Nuwacell? ?hPSC Dissociation Buffer 消化 hPSC 示例圖片

      (A)EDTA 消化4min;(B)EDTA 消化6min;(C)EDTA 消化8min。標尺:200μm


      13、原代hMSC分離培養

      Nuwacell? ncMission hMSC Medium分離培養的臍帶來源hMSC細胞DAY?12形態圖示。?

      圖示分別為形成的不同大小hMSC克隆,0.5g臍帶華通氏膠組織/T75培養瓶。標尺:200μm。

      Nuwacell? ncMission hMSC Medium與對照培養基Commericial A分離培養臍帶hMSC對比圖示。

      0.5g臍帶華通氏膠組織/T75培養瓶,統計Day12生成克隆數(A)、收獲細胞總量(B)和克隆出現時間(C)。

      ncMission hMSC Medium原代分離培養hMSC效果顯著優于Commericial A。

      14、細胞形態與生長情況

      連續培養的Nuwacell? hiPSC-EGFP細胞株細胞形態圖示。熒光倒置顯微鏡圖示。

      圖A、B為正常傳代DAY 3(P30)細胞圖示,C、D為單細胞傳代DAY 8(P30)細胞圖示。標尺:200μm。

      15、細胞GFP陽性率檢測

      連續培養的Nuwacell? hiPSC-EGFP細胞株GFP陽性率檢測,GFP陽性率>90%。

      EGFP-1為正常傳代DAY 3(P30)細胞,EGFP-1為單細胞傳代DAY 8(P30)細胞。

      上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為hiPSC陰性對照;黑線為GFP-hiPSC的GFP陽性率結果。?

      16、細胞表面標志物檢測

      Nuwacell? hiPSC-EGFP細胞株(P30)細胞表面標志物檢測結果。

      上圖為流式細胞分析結果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細胞表面標志物抗體。?

      17、細胞多能基因檢測

      Nuwacell? hiPSC-EGFP細胞株(P30)細胞多能基因檢測結果。

      上圖為qRT-PCR分析結果,POU5F1與NANOG為細胞多能基因。?

      18、細胞染色體核型檢測

      Nuwacell? hiPSC-EGFP細胞株(P30)細胞核型檢測結果46,XY。

      結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。?

      19、細胞分化潛能檢測

      Nuwacell? hiPSC-EGFP細胞株(P30)細胞在免疫缺陷小鼠體內形成畸胎瘤。標尺:100μm。

      E、F、G分別為神經組織(外胚層)、軟骨組織(中胚層)、腸上皮組織(內胚層),成瘤時間8周。?

      20、細胞形態與生長情況

      連續傳代培養的Nuwacell? 原代hMSC細胞P3、P4、P5代DAY?3形態圖示。
      接種密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培養基用量,T25培養瓶連續培養3天。標尺:200μm 。


      21、原代hMSC細胞表面抗體檢測

      連續培養的原代hMSC細胞(P5)表面標志物檢測:

      CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

      (上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細胞表面標志物抗體)?



      22、原代hMSC細胞三系分化驗證

      連續培養的原代hMSC細胞(p5)三系分化功能實驗。

      A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。?標尺:100μm。?


      23、分化詳細流程圖

      Nuwacell? hPSC-間充質干細胞分化試劑盒分化流程圖。


      24、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-間充質干細胞分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖示分別為分化過程中DAY?1、3、8、14時的細胞形態。標尺:200μm。




      25、hPSC來源MSC細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-間充質干細胞分化試劑盒分化的MSC細胞形態圖示。

      圖示分別為hPSC-MSC生長到P1、P3、P6代的細胞形態(匯合度80-85%)。標尺:200μm。



      26、hPSC來源MSC細胞表面抗體檢測

      連續培養的hPSC-MSC(P3)細胞表面標志物檢測:

      CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

      (上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細胞表面標志物抗體)


      27、hPSC來源MSC細胞三系分化潛能檢測

      連續培養的hPSC-MSC(P3)細胞三系分化功能實驗。

      A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標尺:200μm。

      28、分化詳細流程圖

      Nuwacell?? hPSC-RPE分化試劑盒分化流程圖。

      29、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      A:DAY 0(hPSC);? B:DAY 6(RPE progenitors);C:DAY 16(Immature RPE);? D:DAY45(Mature RPE)。標尺:200μm。


      30、hPSC來源RPE細胞特異性標志物檢測

      Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE細胞(DAY 45)。

      細胞特異性標志物(ZO-1/MiTF)檢測結果(免疫熒光染色)。標尺:200μm。


      Nuwacell?? hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE(DAY 45)細胞特異性標志物檢測。

      ZO-1/MiTF/RPE65/BEST1/MERTK/PEDF是成熟RPE細胞的特異性標志物;E:流式細胞法檢測;F:RT-qPCR檢測。

      31、分化詳細流程圖

      Nuwacell?hPSC-類腎器官分化試劑盒分化流程圖。


      32、分化DAY 0-8細胞形態圖示

      Nuwacell?? hPSC-類腎器官分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖示分別為分化第0、4、6、8天時的細胞形態圖示。標尺:200μm。

      33、2D分化DAY 8-20細胞形態圖示

      Nuwacell?? hPSC-類腎器官分化試劑盒2D分化過程中細胞形態圖示。

      圖A、B分別為為2D分化第14、20天時的細胞形態圖示,圖C為2D分化第20天時的放大細胞形態圖示。標尺:200μm。


      34、3D分化DAY 8-17細胞形態圖示

      Nuwacell?? hPSC-類腎器官分化試劑盒3D分化過程中細胞形態圖示。

      圖D為3D分化第13天時的細胞形態圖示,圖E、F為3D分化第17天時的細胞形態圖示。標尺:200μm。

      35、hPSC來源腎上皮細胞特異性標志物表達檢測

      hPSC來源類腎器官(2D分化,DAY 20)特異性標志物表達檢測(免疫熒光染色)圖示。

      PODXL、CDH1、LTL、PAX8分別為足細胞、遠端小管、近端小管、腎囊特異性標志物(激光掃描共聚焦顯微鏡)。標尺:50μm。


      36、分化詳細流程圖

      Nuwacell??hPSC-運動神經元分化試劑盒分化流程圖。?




      37、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-運動神經元分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖A、B、C、D分別為分化第4、9、12、30天時的細胞形態圖示。標尺:200μm。

      38、hPSC來源運動神經元分化過程中細胞檢測

      hPSC來源運動神經元分化到DAY 9(MNP)時細胞特異性標志物檢測結果。

      Olig2,Tubulin是MNP細胞的特異性標志物,免疫熒光染色圖示。標尺:50μm。

      hPSC來源運動神經元分化到DAY 35時(mMN,成熟運動神經元)細胞特異性標志物檢測結果。

      CHAT,βⅢ-Tubulin是mMN的特異性標志物,免疫熒光染色圖示。標尺:50μm。


      39、hPSC來源運動神經元分化過程中特異性標志物檢測

      A:hPSC來源運動神經元分化過程中MNP(DAY?0-9)特異性標志物(PAX6、OLIG2)檢測結果。

      B:hPSC來源運動神經元分化過程中pMN(DAY?9-12)特異性標志物(ISL1、HB9)檢測結果。

      C:hPSC來源運動神經元分化過程中mMN(DAY?15-40)特異性標志物(CHAT、MAP2、Synapyophysin)檢測結果。


      40、hPSC來源成熟運動神經元膜片鉗電生理檢測

      hPSC來源成熟運動神經元(DAY?30)膜片鉗電生理檢測結果。

      選取符合形態特征的神經元進行膜片鉗測試,可檢測到自發放電。標尺:50μm。



      41、分化詳細流程圖

      Nuwacell? hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化流程圖。

      42、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經元分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖示為DAY? 0啟動分化時的hPSC,DAY? 11收獲的mDAP(多巴胺能神經前體細胞),

      DAY?12維持培養的mDAP,DAY?45的mDAN(成熟多巴胺能神經元)。標尺:200μm。



      43、hPSC來源多巴胺能前體細胞(mDAP)特異性標志物檢測

      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化的mDAP細胞熒光圖示。

      Lmx1a,Foxa2,En1為mDAP的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。


      Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化的mDAPs特異性標志物檢測。

      圖A為RT-qPCR檢測;圖B為流式細胞法檢測。NKX2.1、DBX1為前腦標志物;Lmx1a、Foxa2、En1、OTX2為中腦標志物,GBX2為后腦標志物。


      44、hPSC來源成熟多巴胺能神經元(mDAN)特異性標志物和功能檢測

      hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 40)細胞熒光圖示。

      TH和Nurr1為成熟mDAN的細胞特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。

      hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 45)多巴胺釋放水平檢測結果。?

      對照組為hPSC細胞,正常細胞多巴胺釋放為0-100pg/mL,放射性免疫法檢測。?

      45、細胞形態與生長情況

      Nuwacell? 間充質干細胞凍存液保存的hMSC復蘇后形態圖示。
      圖A、B、C分別為P3代培養第1、2天、3天的hMSC形態圖示。標尺:200μm。

      46、細胞形態圖示

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)形態圖示。?
      圖示分別為hPSC-MSC生長到DAY?1、DAY?2、DAY?3時的細胞形態圖示。標尺:200μm 。

      47、細胞表面標志物檢測

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)表面標志物檢測:

      CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

      (上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細胞表面標志物抗體)

      48、細胞三系分化功能檢測

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)三系分化功能實驗。?

      A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標尺:200μm。

      49、hPSC-運動神經元前體細胞復蘇培養形態圖示

      Nuwacell? hPSC-運動神經元前體細胞復蘇后DAY?1-DAY?21細胞形態圖示。標尺:200μm 。

      50、hPSC-多巴胺能神經前體細胞復蘇培養形態圖示

      Nuwacell? ?hPSC-多巴胺能神經前體細胞復蘇、維持培養與成熟分化形態圖示。
      圖A、B、C分別為hPSC-多巴胺能神經前體細胞(mDAP)復蘇DAY?1、DAY?2和DAY?4細胞形態圖示;
      圖D、E、F分別為mDAP分化為成熟多巴胺能神經元(mDAN)過程的DAY?1、DAY?9和DAY?30細胞形態圖示。?標尺:200μm。

      51、hPSC-多巴胺能神經前體細胞特異性標志物檢測

      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞(mDAP)熒光圖示。

      Lmx1a,Foxa2,En1為mDAPs細胞的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。

      52、成熟多巴胺能神經元(mDAN)特異性標志物和功能檢測

      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經元(mDAN,復蘇后DAY 25)細胞熒光圖示。

      TH和Nurr1為成熟多巴胺能神經元(mDAN)的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。?

      53、hPSC-腎元祖細胞形態圖示

      Nuwacell?? hPSC-腎元細胞復蘇及繼續分化DAY?2-DAY?12的細胞形態圖示。標尺:200μm。?

      54、hPSC-腎元祖細胞分化潛能檢測

      Nuwacell? hPSC-腎元祖細胞2D分化類腎器管特異性標志物檢測熒光染色圖示。

      PODXL、CDH1、LTL分別為足細胞、遠端小管、近端小管特異性標志物(倒置熒光顯微鏡)。標尺:100μm。

      55、hPSC-RPE細胞形態圖示

      Nuwacell? ?hPSC-RPE細胞復蘇后DAY1-DAY15細胞形態圖示。
      DAY8時可見典型RPE細胞形態,DAY10開始可見明顯黑色素分泌。標尺:200μm。

      56、hPSC-RPE細胞特異性標志物檢測

      Nuwacell? hPSC-RPE細胞(復蘇后DAY 20)細胞特異性標志物(ZO-1/MiTF)檢測結果(免疫熒光染色)。標尺:200μm。

      57、細胞傳代培養

      Nuwacell??ncMission hMSC Medium連續傳代培養的P3、P4、P5代hMSC細胞DAY?3形態圖示。

      接種密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培養基用量,T25培養瓶連續培養3天。標尺:200μm 。



      Nuwacell? ncMission hMSC Medium與對照培養基Commericial A連續培養hMSC對比圖示。

      接種密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培養基用量,T25培養瓶連續培養3天。細胞倍增曲線(D)和倍增時間(E)對比。

      ncMission hMSC Medium連續傳代培養hMSC效果顯著優于Commericial A。

      58、細胞形態圖示

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)形態圖示。?
      圖示分別為hPSC-MSC生長到DAY?1、DAY?2、DAY?3時的細胞形態圖示。標尺:200μm 。


      59、細胞表面標志物檢測

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)表面標志物檢測:

      CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

      (上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細胞表面標志物抗體)

      60、細胞三系分化功能檢測

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)三系分化功能實驗。

      A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標尺:200μm。

      61、細胞表面標志物檢測

      Nuwacell? ncMission hMSC Medium連續培養的hMSC細胞(P5)表面標志物檢測:

      CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

      (上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細胞表面標志物抗體)?



      62、醫療器械注冊備案信息

      Nuwacell? 間充質干細胞凍存液獲得第一類醫療器械注冊備案資質(備案號:皖合械備20180042號)。

      63、細胞形態與生長情況

      hiPSC/hESC 培養基-ncTarget 連續培養的hiPSC(P20)細胞形態圖示。
      圖A、B、C分別為培養第2、3、4天時hiPSC的形態圖示,D為培養至第4天時的放大細胞圖示。標尺:200μm。

      64、單細胞傳代圖片

      hiPSC/hESC 培養基-ncTarget 連續培養的hiPSC(P20)單細胞傳代圖示。

      圖E、F、G分別為培養第3、5、7天時,顯微鏡下hiPSC的形態圖示。標尺:200μm。

      65、細胞表面標志物檢測

      hiPSC/hESC 培養基-ncTarget 連續培養的hiPSC(P20)細胞表面標志物檢測。
      上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細胞表面標志物抗體。

      66、多能基因檢測

      hiPSC/hESC 培養基-ncTarget 連續培養的hiPSC(P20)多能性基因檢測結果。
      上圖為qRT-PCR分析結果,POU5F1與NANOG為細胞多能基因。

      67、基因組穩定性檢測

      hiPSC/hESC 培養基-ncTarget 連續培養的hiPSC(P20)基因組穩定性檢測。

      核型:46,XY,分辨率:400帶。結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。



      68、hMSC三系分化鑒定

      Nuwacell? ncMission hMSC Medium連續培養的hMSC細胞(P5)三系分化鑒定:

      F:脂肪分化(油紅染色法);G:硬骨分化(茜素紅染色法);H:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標尺:200μm 。

      hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 42)膜片鉗測試結果。

      選取符合形態特征的mDA進行膜片鉗測試,可檢測到較穩定的2-10Hz的節律性自發放電;

      在電壓鉗模式下,給以超極化電壓可見緩慢增大的內向電流(H電流)。標尺:20μm。

      69、細胞核型檢測

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)染色體核型檢測。核型:46,XX,分辨率:400帶。
      結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。

      70、細胞核型檢測

      連續培養的Nuwacell??hPSC-間充質干細胞(P5)染色體核型檢測。核型:46,XX,分辨率:400帶。
      結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。

      71、分化詳細流程圖

      Nuwacell? hPSC-間充質干細胞分化試劑盒分化流程圖。


      72、分化詳細流程圖

      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化流程圖。

      73、分化詳細流程圖

      Nuwacell??hPSC-運動神經元分化試劑盒分化流程圖。?

      74、分化詳細流程圖

      Nuwacell?hPSC-類腎器官分化試劑盒分化流程圖。


      75、分化詳細流程圖

      Nuwacell???hPSC-RPE分化試劑盒分化流程圖。

      76、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經元分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖示為DAY??0啟動分化時的hPSC,DAY??11收獲的mDAP(多巴胺能神經前體細胞),

      DAY?12維持培養的mDAP,DAY?45的mDAN(成熟多巴胺能神經元)。標尺:200μm。

      77、hPSC來源多巴胺能前體細胞(mDAP)特異性標志物檢測

      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化的mDAP細胞熒光圖示。

      Lmx1a,Foxa2,En1為mDAP的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。

      Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化的mDAPs特異性標志物檢測。

      圖A為RT-qPCR檢測;圖B為流式細胞法檢測。NKX2.1、DBX1為前腦標志物;Lmx1a、Foxa2、En1、OTX2為中腦標志物,GBX2為后腦標志物。


      78、hPSC來源成熟多巴胺能神經元(mDAN)特異性標志物和功能檢測

      hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 40)細胞熒光圖示。

      TH和Nurr1為成熟mDAN的細胞特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。

      hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 45)多巴胺釋放水平檢測結果。?

      對照組為hPSC細胞,正常細胞多巴胺釋放為0-100pg/mL,放射性免疫法檢測。?

      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 45)的膜片鉗測試結果。
      選取符合形態特征的mDAN進行膜片鉗測試,可檢測到較穩定的2-10Hz的節律性自發放電。標尺:20μm。

      79、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-運動神經元分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖A、B、C、D分別為分化第4、9、12、30天時的細胞形態圖示。標尺:200μm。

      80、hPSC來源運動神經元分化過程中細胞檢測

      hPSC來源運動神經元分化到DAY 9(MNP)時細胞特異性標志物檢測結果。

      Olig2,Tubulin是MNP細胞的特異性標志物,免疫熒光染色圖示。標尺:50μm。

      hPSC來源運動神經元分化到DAY 35時(mMN,成熟運動神經元)細胞特異性標志物檢測結果。

      CHAT,βⅢ-Tubulin是mMN的特異性標志物,免疫熒光染色圖示。標尺:50μm。

      81、hPSC來源運動神經元分化過程中特異性標志物檢測

      A:hPSC來源運動神經元分化過程中MNP(DAY?0-9)特異性標志物(PAX6、OLIG2)檢測結果。

      B:hPSC來源運動神經元分化過程中pMN(DAY?9-12)特異性標志物(ISL1、HB9)檢測結果。

      C:hPSC來源運動神經元分化過程中mMN(DAY?15-40)特異性標志物(CHAT、MAP2、Synapyophysin)檢測結果。

      82、hPSC來源成熟運動神經元膜片鉗電生理檢測

      hPSC來源成熟運動神經元(DAY?30)膜片鉗電生理檢測結果。

      選取符合形態特征的神經元進行膜片鉗測試,可檢測到自發放電。標尺:50μm。

      83、分化DAY 0-8細胞形態圖示

      Nuwacell???hPSC-類腎器官分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖示分別為分化第0、4、6、8天時的細胞形態圖示。標尺:200μm。

      84、2D分化DAY 8-20細胞形態圖示

      Nuwacell???hPSC-類腎器官分化試劑盒2D分化過程中細胞形態圖示。

      圖A、B分別為為2D分化第14、20天時的細胞形態圖示,圖C為2D分化第20天時的放大細胞形態圖示。標尺:200μm。

      85、3D分化DAY 8-17細胞形態圖示

      Nuwacell???hPSC-類腎器官分化試劑盒3D分化過程中細胞形態圖示。

      圖D為3D分化第13天時的細胞形態圖示,圖E、F為3D分化第17天時的細胞形態圖示。標尺:200μm。

      86、hPSC來源腎上皮細胞特異性標志物表達檢測

      hPSC來源類腎器官(2D分化,DAY 20)特異性標志物表達檢測(免疫熒光染色)圖示。

      PODXL、CDH1、LTL分別為足細胞、遠端小管、近端小管特異性標志物(倒置熒光顯微鏡)。標尺:100μm。


      87、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      A:DAY 0(hPSC);? B:DAY 6(RPE progenitors);C:DAY 16(Immature RPE);? D:DAY45(Mature RPE)。標尺:200μm。

      88、hPSC來源RPE細胞特異性標志物檢測

      Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE細胞(DAY 45)。

      細胞特異性標志物(ZO-1/MiTF)檢測結果(免疫熒光染色)。標尺:200μm。


      Nuwacell???hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE(DAY 45)細胞特異性標志物檢測。

      ZO-1/MiTF/RPE65/BEST1/MERTK/PEDF是成熟RPE細胞的特異性標志物;E:流式細胞法檢測;F:RT-qPCR檢測。

      89、支持hPSC細胞生長圖示

      Nuwacell? ncLaminin511E8F鋪底的hiPSC/hESC 培養基-ncEpic 連續培養的hiPSC(P30,DAY8)單細胞傳代圖示。標尺:200μm。

      90、ncB27無血清添加劑支持神經細胞生長

      Nuwacell? ncB27無血清添加劑支持培養的hPSC-多巴胺能神經前體細胞(mDAP)形態圖示。
      上圖分別為hPSC-mDAP生長DAY1、2、3、5細胞形態圖示。標尺:200μm。

      Nuwacell? ncB27無血清添加劑支持培養的hPSC-多巴胺能神經前體細胞(mDAP,DAY4)熒光圖示。
      Lmx1a,Foxa2為mDAP的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。

      91、分化詳細流程圖

      Nuwacell??hPSC-微血管內皮細胞分化流程圖。

      92、hPSC-血管內皮細胞形態圖示

      hPSC分化的微血管內皮細胞(EC,P2)形態圖示。
      圖示分別為hPSC-EC生長DAY1、2、3細胞形態圖示。標尺:200μm。

      93、hPSC-血管內皮細胞特異性標志物檢測

      hPSC分化的微血管內皮細胞(EC,P2)免疫熒光染色圖示。
      UEA-1和CD31為微血管內皮細胞特異性標志物。標尺:200μm。

      hPSC分化的微血管內皮細胞(EC,P2)免疫熒光染色圖示。
      hPSC-血管內皮細胞表達VE-cadherin(血管內皮鈣粘蛋白)而不表達α-SMA(α-平滑肌肌動蛋白)。標尺:200μm。

      hPSC分化的微血管內皮細胞(EC,P2)特異性標志物檢測。
      CD31和CD144是血管內皮細胞的特異性標志物,流式細胞法檢測。標尺:200μm。

      94、文獻引用

      96、hiPSC電轉效果示例

      Nuwacell? hiPSC/hESC高效電轉液轉染hiPSC示例:

      把2μg表達EGFP的pPBmPNEE的質粒 (~6.5kb)電轉入hiPSC,轉染后24小時使用流式細胞儀檢測EGFP陽性細胞。

      A:電轉時未加入質粒的陰性對照;B:電轉時加入pPBmPNEE質粒。轉染效率可達85.43%。




      97、產品效果示例

      使用Nuwacell??hiPSC/hESC高效電轉液轉染制備的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株細胞形態圖示。
      圖C、D為hiPSC-Luc-GFP(P32)培養DAY 3細胞圖示。標尺:100μm。

      98、單細胞傳代圖片

      hiPSC/hESC 培養基-ncEpic 連續培養的hiPSC(P20)單細胞傳代圖示。

      圖A、B、C分別為培養第1、5、10天時,顯微鏡下hiPSC的形態圖示。標尺:200μm。

      99、原代hMSC細胞核型檢測

      連續培養的原代hMSC細胞(P5)染色體核型檢測。核型:46,XY,分辨率:400帶。
      結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。


      100、hPSC-運動神經元前體細胞熒光染色圖示

      Nuwacell? hPSC-運動神經元前體細胞(MNP)特異性標志物檢測結果。
      Olig2,Tubulin是MNP的細胞特異性標志物,免疫熒光染色圖示。標尺:50μm。?

      101、重編程hiPSC克隆形成圖示

      外周血重編程-hiPSC克隆形成階段細胞形態圖示。

      中盛溯源在重編程建系上有著豐厚的經驗和技術實力,每次重編程可獲得上百個細胞克??;

      如上圖所示一個視野下擁有10個hiPSC克隆出現,大量的克隆出現保證了重編程的高成功率。標尺:200μm。


      102、細胞敲入基因信息

      Nuwacell? 科研級hiPSC-Luc-GFP細胞株Rosa 26 位點敲入基因信息示意圖。




      Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經元(mDAN,復蘇后DAY 33)的膜片鉗測試結果。
      選取符合形態特征的mDAN進行膜片鉗測試,可檢測到較穩定的2-10Hz的節律性自發放電。標尺:20μm。

      Nuwacell? ncLaminin511E8F支持多種多能干細胞(hPSC)的生長。?標尺:200μm。

      上圖分別為RC01001-A、RC01001-B、H9和NCB19001生長至DAY4細胞形態圖示,Nuwacell? hiPSC/hESC培養基-ncEpic培養。

      103、細胞表面標志物檢測

      hiPSC/hESC 培養基-ncEpic 連續培養的hiPSC(P20)細胞表面標志物檢測。
      上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細胞表面標志物抗體。

      104、重編程后hiPSC克隆形態圖示

      外周血重編程初始階段及擴增后的hiPSC克隆形態圖示。

      圖A、B為重編程初始hiPSC克隆和擴增后的hiPSC克隆。標尺:200μm

      105、成熟hPSC-運動神經元熒光染色圖示

      Nuwacell? hPSC-運動神經元前體細胞繼續分化的成熟運動神經元(mMN,復蘇后DAY 26)特異性標志物檢測結果。
      MAP2,βⅢ-Tubulin是mMN的特異性標志物,免疫熒光染色圖示。標尺:50μm。

      106、細胞形態與生長情況

      連續培養的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞形態圖示。熒光倒置顯微鏡圖示。
      圖A、B為正常傳代DAY 2細胞圖示,C、D為正常傳代DAY 3細胞圖示。標尺:100μm。



      108、分化過程中細胞形態圖示

      Nuwacell? hPSC-間充質干細胞分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

      圖示分別為分化過程中DAY?1、3、8、14時的細胞形態。標尺:200μm。

      不同鋪底基質進行hiPSC單細胞傳代細胞貼壁效果對比。6孔板,1000cells/孔hiPSC接種,統計DAY6生長克隆數。
      Nuwacell? ncLaminin511E8F顯著優于其他鋪底基質。

      109、多能基因檢測

      hiPSC/hESC 培養基-ncEpic 連續培養的hiPSC(P20)多能性基因檢測結果。
      上圖為qRT-PCR分析結果,OCT4與NANOG為細胞多能基因。

      110、細胞GFP陽性率檢測

      連續培養的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)GFP陽性率檢測,GFP表達陽性。
      上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為hiPSC陰性對照;黑線為hiPSC-Luc-GFP細胞株的GFP陽性率結果。

      111、成熟運動神經元功能檢測

      Nuwacell??hPSC-運動神經元前體細胞繼續分化的成熟運動神經元(mMN,復蘇后DAY 21)膜片鉗電生理檢測結果。
      選取符合形態特征的神經元進行膜片鉗測試,可檢測到自發放電。標尺:50μm。

      112、hPSC來源MSC細胞表面抗體檢測

      連續培養的hPSC-MSC(P3)細胞表面標志物檢測:

      CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

      (上圖為流式細胞分析結果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細胞表面標志物抗體)

      113、支持神經元生長細胞圖示

      Nuwacell? ncLaminin511E8F鋪底的連續培養的hPSC-運動神經元細胞圖示。標尺:200μm。

      114、基因組穩定性檢測

      hiPSC/hESC 培養基-ncEpic 連續培養的hiPSC(P20)基因組穩定性檢測。核型:46,XX,分辨率:400帶。

      結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。



      115、細胞熒光素酶(Luciferase)活性檢測

      Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)熒光素酶(Luciferase)活性檢測結果。
      上圖為RLU(相對熒光強度)分析結果,其中陰性對照為普通hiPSC,hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)的熒光素酶(Luciferase)報告基因表達陽性。


      116、hPSC來源MSC細胞三系分化潛能檢測

      連續培養的hPSC-MSC(P3)細胞三系分化功能實驗。

      A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標尺:200μm。

      117、細胞表面標志物檢測

      Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞表面標志物檢測結果。

      上圖為流式細胞分析結果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細胞表面標志物抗體。

      118、細胞多能基因檢測

      Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞多能基因檢測結果。

      上圖為qRT-PCR分析結果,POU5F1與NANOG為細胞多能基因。

      120、細胞染色體核型檢測

      Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞核型檢測結果46,XY。

      結果解釋:G顯帶,計數20個分裂相,核型分析5個,未發現染色體數目或結構異常。

      121、細胞分化潛能檢測

      Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細胞株(P30)細胞在免疫缺陷小鼠體內形成畸胎瘤。

      E、F、G分別為神經組織(外胚層)、軟骨組織(中胚層)、腸上皮組織(內胚層),成瘤時間8周。標尺:100μm。

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